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黄曲霉毒素、磺胺类药物(HPLC-柱后衍生法)的检测方案
2021-01-09 浏览次数:0
随着生活水平的不断提高,人们对食品卫生品质的要求越来越高。影响食品卫生品质的因素很多,如生物污染、物理污染、农药和药物残留污染、重金属及其它化学污染、滥用食品添加剂等,其中影响食品安全的真菌毒素类物质的代表性物质一黄曲霉毒素,因其污染所造成的危害已经备受关注。
黄曲霉毒素是黄曲霉菌、寄生曲霉菌产生的代谢物,有剧毒,同时还有致癌、致畸、致突变的作用,为迄今发现的各种真菌毒素中最稳定的一种。黄曲霉毒素主要引起肝癌,还可以诱发骨癌、肾癌、直肠癌、乳腺癌、卵巢癌等,是目前发现的化学致癌物中毒性最强的物质之一。 因此国际上对食品中黄曲霉毒素有严格的限量要求。
黄曲霉毒素存在于土壤、动植物、各种坚果(特别是花生和核桃)中。日常检验发现在大豆、谷物、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素(其中以花生和玉米污染最严重)。
目前,尚无绝对有效的措施避免黄曲霉毒素的污染,因此,为保障食品安全,严格进行黄曲霉毒素含量的检测和监控至关重要!
目前对粮油食品中黄曲霉毒素的定性和定量分析方法很多,常用的有薄层层析法(TLC)、液相色谱法(LC)、免疫分析法、金标试纸法和生物传感器法等。其中,液相色谱法是在黄曲霉毒素研究方面应用最广的分离技术之一,是目前国内绝大多数检测机构使用的方法。
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黄曲霉毒素的化学结构已确定10多种,最常见四种为B1、B2、G1、G2,其中B1和G1的荧光性能太弱,其最低检测限无法达到,在使用“高效液相色谱法”测定黄曲霉毒素时,为提高其检测灵敏度,通常需要配备柱后衍生装置进行处理,即国标GB5009.22—2016中的“高效液相色谱-柱后衍生法”。
原理:实验过程中,提取液经免疫亲和柱净化和富集,净化液浓缩、定容和过滤后经液相色谱柱分离,柱后衍生(碘或溴试剂衍生、光化学衍生、电化学衍生等),经荧光检测器检测,样品被转换成光信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
其中,柱后衍生装置用户大多选用光化学衍生,其优点如下:
使用更经济,低成本维护,衍生时间大大缩短(在5分钟即可完成)
流速可以达到2ml/分钟
无需使用化学物质(经济的同时,也避免操作人员接触有毒化学物质)
增加仪器的寿命(没有腐蚀性酸流经毛细管)
可持续工作数千小时,用后无需冲洗步骤
可通过开关确定黄曲霉毒素种类,结果与电化学方法(溴衍生)一致
不仅可与普通HPLC配合使用,更适用于UPLC(超液相)使用
光化学衍生器,其特殊设计的编织型反应线圈(核心组件),材质为化学稳定性极强的PTFE,使用时,将其置于HPLC柱和荧光检测器之间,进行柱后连续光化学衍生反应,可提高荧光、紫外、电化学检测和化学发光检测器的灵敏度和响应的选择性。
目前,该技术已被成功应用于水中苯基脲类农药和巴比妥酸盐类化合物,氨基酸、多肽、黄曲霉毒素及磺胺类药物分析,以及检测粮食、中药、饲料和食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检测分析。
特点:
在线对黄曲霉毒素B1、G1进行衍生,不需要任何化学试剂
黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的最低检测限均小于0.5 PPB
衍生体积1-2ml/分钟;衍生时间:1-5分钟
兼容所有品牌的液相以及荧光检测器 美国油脂协会标准AOCS Aa 11-05指定设备
国际分析化学家协会标准AOAC 2005.08指定设备
卫生部化学污染物及有害因素监测计划推荐设备
符合欧盟药典 2.8.18的要求
符合中国新的粮油行业标准、2015版药典方法、饲料国标要求,符合GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定